分光光度計(jì)可以安裝在許多研究、生物學(xué)、化學(xué)和工業(yè)實(shí)驗(yàn)室中。分光光度計(jì)用于不同科學(xué)領(lǐng)域的研究和數(shù)據(jù)評(píng)估。它提供了高度的精度、靈敏度和準(zhǔn)確度。此外，它價(jià)格低廉，適用于多種物質(zhì)的測(cè)量。分光光度計(jì)的作用是傳輸和接收光。分光光度計(jì)用于通過使用樣品的光通過并研究波長的強(qiáng)度來評(píng)估測(cè)試材料的樣品。

　　不同的樣品以多種不同的方式修改光，這使研究人員可以通過觀察光通過樣品時(shí)的傳導(dǎo)變化來獲得有關(guān)檢查內(nèi)容的更多事實(shí)。

分光光度計(jì)的組成

　　有不同類型的分光光度計(jì)可用，但它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)和部件上都有相似之處。在了解分光光度計(jì)的工作原理之前，讓我們概述一下該設(shè)備的組件。

　　燈：光源

　　單色器：隔離光源特定波長帶的一種方法，提供單色光，即所有光子具有相同波長的光

　　比色皿或細(xì)胞：樣品架

　　探測(cè)器：測(cè)量光強(qiáng)的裝置

　　顯示：顯示樣品的透射率和吸光度

分光光度計(jì)的工作原理

　　電磁輻射(光)與物質(zhì)之間存在相互作用。分光光度計(jì)由兩個(gè)儀器組成，即用于產(chǎn)生任何選定顏色(波長)的光的分光計(jì)和用于測(cè)量光強(qiáng)度的光度計(jì)。通過管的光量由光度計(jì)測(cè)量。光度計(jì)將電壓信號(hào)傳送到顯示設(shè)備，該信號(hào)隨著液體吸收的光量的變化而變化。

　　分光光度計(jì)的性能數(shù)據(jù)

　　這些儀器最重要的性能特點(diǎn)是：

　　可測(cè)量的量(例如僅吸光度，或吸光度和反射率);

　　可訪問的光譜范圍，理想的是 UV – VIS – IR;

　　光譜分辨率(固定或可變，通常受單色儀限制);

　　吸光度范圍(受光源和檢測(cè)器靈敏度限制);

　　給定光譜范圍和分辨率的測(cè)量時(shí)間;

分光光度計(jì)如何工作?

　　以下是分光光度計(jì)的工作原理。將樣品溶液置于分光光度計(jì)內(nèi)。一盞燈提供光源。光束撞擊衍射光柵，衍射光柵像棱鏡一樣工作，并將光分成其分量波長。一個(gè)可調(diào)節(jié)的狹縫只允許一種特定波長的光通過樣品溶液。然后光與樣品相互作用。光的波長照射樣品，樣品保存在比色皿中。我們?cè)谔幚肀壬髸r(shí)需要小心;即使是輕微的指紋也會(huì)干擾結(jié)果。從這一點(diǎn)開始，檢測(cè)器測(cè)量樣品的透射率和吸光度。

　　透射率是指完全通過樣品并照射到檢測(cè)器的光量。吸光度是對(duì)樣品吸收的光的測(cè)量。檢測(cè)器感應(yīng)穿過樣品的光，并將此信息轉(zhuǎn)換為輸出屏幕上的數(shù)字顯示。

　　使用分光光度計(jì)的步驟

　　預(yù)熱分光光度計(jì)時(shí)，機(jī)器中不應(yīng)有比色皿;

　　樣品制備;

　　一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液;

　　將分光光度計(jì)設(shè)置為最大光吸收波長。測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的吸光度;

　　將光的百分比透射率設(shè)置為 0%;

　　在樣品空間中，放置一個(gè)裝滿溶劑的比色皿并關(guān)閉樣品空間;

　　將透射率設(shè)置為 100%;

　　為了比較，用樣品填充比色皿并將其放置在樣品空間中并關(guān)閉樣品空間;

　　記下光度計(jì)上的讀數(shù)以進(jìn)行計(jì)算;

　　繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：吸光度與濃度;

　　使用 Beer-Lambert 方程計(jì)算樣品濃度：A = ECL;